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【来源】 本品为菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L.的干燥头状花序。秋、冬两季花初开放时采摘,晒干,或蒸后晒干。
【功能与主治】 清热解毒,泻火平肝。用于疔疮痈肿,目赤肿痛,头痛眩晕。
【含量测定】 蒙花苷照液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水-冰醋酸(26:23:1)为流动相;检测波长为334 nm。理论板数按蒙花苷峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备:取蒙花苷对照品适量,精密称定,加甲醇(必要时加热)制成每1 mL含25μg的溶液,即得。
供试品溶液的制备:取本品粉末(过三号筛)约0.25 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇100 mL,称定重量,加热回流3小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20 µL,注入液相色谱仪,测定,即得。
【色谱行为描述】
《中国药典》中野菊花的含量测定以蒙花苷为质量评价依据,蒙花苷在InertsilODS-3(4.6×250mm,5μm)中的色谱行为是:在流动相组成为甲醇-水-冰醋酸系统时,流动相的比例对蒙花苷及其相邻色谱峰的分离度有一定影响,流动相比例为甲醇:水:醋酸=52:46:2时,其分离效果与分析时间合适,选择甲醇的比例在48%~57%(v/v)之间均可获得较好的分析效果;柱温对蒙花苷的保留时间及其相邻色谱峰的分离度有微小影响,经考察建议温度为30℃;流动相中醋酸对蒙花苷的分离度及拖尾因子均无明显影响,但对分析时间有一定的改变,在醋酸浓度2%(pH=2.01)时较为合适。推荐流动相配比范围:甲醇:水:冰醋酸(48~57):(41~51):(1~5),柱温范围:25~35℃。综上所述,经考察在流动相甲醇-水-冰醋酸比例为52:48:2,柱温30℃的色谱条件下能得到较满意的分析效果。
野菊花在上述色谱条件下,采用Shim-pack VP-ODS色谱柱表现出和Inertsil ODS-3色谱柱相似的色谱行为,保留时间和柱效相当。
样品来源: 本品为菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L.的干燥头状花序。秋、冬两季花初开放时采摘,晒干,或蒸后晒干。
对照品: 蒙花苷(成都曼斯特生物科技有限公司,批号:MUST-15101207,含量:99.51%)
对照品溶液的制备: 取蒙花苷对照品适量,精密称定,加甲醇(必要时加热)制成每1 mL含25μg的溶液,即得。
供试品溶液的制备: 取本品粉末(过三号筛)约0.25 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇100 mL,称定重量,加热回流3小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
推荐使用色谱条件: | 仪器配置: | ||
色谱柱: | 5020-01732 Inertsil ODS-3 (4.6×250 mm,5μm ) | LC-20AD 高压泵 | |
流动相: | 甲醇-水-冰醋酸(26:23:1) | SPD-10AVP紫外可见光检测器 | |
柱温: | 30℃ | DGU-20A3脱气机 | |
检测波长: | 334nm | CTO-10ASVP柱温箱 | |
流速: | 1.0mL/min | SIL-10ADVP 自动进样器 | |
进样量: | 20μL | ||
*此条件同样适用于Shim-pack VP-ODS(4.6×250 mm, 5 μm),相关谱图见附注1。 |
序号 | 对照品(10μL) | 样品(20μL) | ||
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t/min | 峰面积 | t/min | 峰面积 | |
1 | 13.041 | 1320558 | 12.924 | 1442579 |
2 | 13.083 | 1316741 | 12.950 | 1431804 |
3 | 13.020 | 1317305 | 13.013 | 1427972 |
平均值 | 13.048 | 1318201 | 12.960 | 1434118 |
RSD/% | 0.24 | 0.16 | 0.35 | 0.53 |