使用液相色谱柱比传统方法简单快捷
点击次数:1378 更新时间:2019-11-25
液相色谱柱应用于药物分析、卫生防疫、环境监测、农业、林业、渔业、畜牧业、制造业、石油化工、质量监督、教育研究、水利系统等领域。使用液相色谱柱比传统方法简单快捷,且所需样品量少。
液相色谱柱是样品组分在柱填料和流动相之间的质量交换,以达到分离的目的,因此流动相需要具备以下特性:
1、液相色谱柱的流动相对于样品具有一定的溶解能力,确保样品组分不会在色谱柱中沉淀(或长时间保留在色谱柱中)。
2、液相色谱柱的流动相和样品之间不发生化学反应。
3、为了获得良好的分离效果,流动相的粘度应尽可能小;降低色谱柱的压降,延长泵的使用寿命(提高温度可以降低流动相的粘度)。
4、流动相的物理和化学性质应与所用的检测器相适应。如使用UV检测器,使用对紫外吸收较低的溶剂配制。
5、流动相的沸点不应该太低,否则很容易产生气泡,这将使实验无法进行。
6、在制备流动相后,必须进行脱气。除去溶解在流动相中的痕量气体不仅有利于检测,而且可以防止流动相中的痕量氧与样品相互作用。
使用经验:
一、柱头型与不锈钢毛细管接头的匹配
液相色谱柱是消耗品,不是原始设备。有很多情况下,如果连接器和柱头的深度不匹配,将会发生泄漏或过大的死体积。接头的深度比柱头的深度长,所以不容易拧紧和泄漏液体。接入深度比柱头短,柱头上有缝隙,导致死体积,峰带变宽和峰拖尾。
二、溶剂的匹配转换
如果储存在液相色谱柱中的溶剂和储存在仪器系统中的溶剂与流动相不匹配,则应在使用前进行转化。特别是当流动相含有缓冲盐时,如果色谱柱保存溶剂是纯有机相或者有机相的比例高,色谱柱直接与仪器连接使用,将导致流动相进入色谱柱后,缓冲盐结晶和沉淀,导致柱头堵塞。建议经常使用缓冲盐的仪器和色谱柱,使用5-10%的有机溶剂进行冲洗维护。